胎牛血清能夠用在科研,生物技術(shù)等控制領(lǐng)域
更新時(shí)間:2021-06-07瀏覽:1085次
胎牛血清應(yīng)用在哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中,應(yīng)用很廣泛。比如,能夠用在科研、工業(yè)生產(chǎn)、人獸疫苗生產(chǎn)的質(zhì)量控制及生物技術(shù)藥物的質(zhì)量控制領(lǐng)域。血清是血液凝固后的液體部分,不含血細(xì)胞、纖維蛋白及凝集因子等,含有多種對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)需要的營(yíng)養(yǎng)因子及大分子物質(zhì)。血清白蛋白是血清主要成分。此外,重要的是,胎牛血清中含有大量對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)需要的生長(zhǎng)因子,也含有一些小分子物質(zhì),如氨基酸、糖類、脂類及激素類物質(zhì)。
胎牛血清采血:
1、挑選出大約8月齡以上的健康妊娠母牛,經(jīng)剖腹獲取小牛。
2、將小牛清洗干凈后,側(cè)放在萬級(jí)潔凈房間內(nèi)的采血臺(tái)上,固定四肢及頭部。
3、用來蘇水清洗心臟外部,刮去心臟外部牛毛,露出心臟外部一側(cè)皮膚,用2%碘酒擦拭消毒。
4、在心臟部位切開一道10厘米左右的切口,取出近心血管,先用2%碘酒消毒,再用75%的酒精消毒,用止血鉗夾住血管,切開1厘米左右的切口進(jìn)行插管,插好管后打開血管的止血鉗,讓牛血順采血管流入另一個(gè)潔凈房間內(nèi)的采血瓶中。
5、采血瓶采血前經(jīng)干烤滅菌(180℃2小時(shí))后,按無菌操作注入10毫升左右經(jīng)高壓滅菌的生理鹽水后加塞封口,于采血前半小時(shí)放入37℃恒溫箱備用。采血前先晃動(dòng)瓶?jī)?nèi)生理鹽水,使其充分濕潤(rùn)瓶壁后倒出,再進(jìn)行采血并加塞封口。將采血后的采血瓶放37℃恒溫室2小時(shí),再放入4℃冷庫(kù)4小時(shí)以備離心。
胎牛血清的常規(guī)處理方式是熱鈍化,即放在56°水浴30分鐘;其目的是使血清中的補(bǔ)體成分及一些未知的細(xì)胞生長(zhǎng)抑制分子失活。熱鈍化處理過程需要小心謹(jǐn)慎,因?yàn)檠逯械纳L(zhǎng)因子容易在較高溫度或者較長(zhǎng)時(shí)間加熱條件下失活,甚至產(chǎn)生沉淀。Gamma照射能夠?qū)μヅQ暹M(jìn)行滅菌處理。常規(guī)的滅菌方法是多次透過0.1um的濾膜以消除微生物污染,而gamma照射能夠鈍化牛群中常見的病毒。但是,一些類型的病毒能夠抵抗gamma照射,比如細(xì)小病毒。