什么是緩沖溶液?緩沖液(Buffer solution)通常是由「弱酸及其共軛堿」或「弱堿及其共軛酸」緩沖對所組成的溶液,能夠在加入一定量其他物質(zhì)時減緩pH的改變。以生物實驗中常用的一種緩沖液PBS為例,是由Na2HPO4、KH2PO4組成的緩沖對,在PH5.8-8.0范圍內(nèi)有較強(qiáng)的緩沖能力。
磷酸鹽緩沖液是無機(jī)化學(xué)及分析化學(xué)中的重要概念,分析測試中,在絡(luò)合滴定和分光光度法等許多反應(yīng)里都要求溶液的pH值保持在一個范圍內(nèi),以保證指示劑的變色和顯色劑的顯色等,這些條件都是通過加入一定量的緩沖溶液達(dá)到的,所以緩沖溶液是分析測試中經(jīng)常需要的一種試劑。
為了保證緩沖溶液有足夠強(qiáng)的緩沖能力,在配制緩沖溶液時,需要做到:
為使酸堿對的濃度比接近于1,應(yīng)根據(jù)所需要維持的pH范圍選擇合適的緩沖對,使其中的弱酸的PKa等于或接近于所要求的pH。
例如,生物培養(yǎng)液中需用PH=7.0的緩沖溶液,已知H2PO4-的pKa2=7.21,因此,H2PO4—HPO42-是可以選擇的合適的緩沖對。如若配制PH=9.0的緩沖溶液,則可選擇NH3·H2O-NH4Cl緩沖對(pKa(NH4+)=9.25)??梢娙跛岬腒a是選擇緩沖溶液的主要依據(jù),表中列出了幾種常用的緩沖溶液。
磷酸鹽緩沖液在生化實驗或研究工作中要慎重地選擇,因為有時影響實驗結(jié)果的因素并不是緩沖液的pH值,而是緩沖液中的某種離子。如硼酸鹽、檸檬酸鹽、磷酸鹽和三羥甲基甲烷等緩沖劑都可能產(chǎn)生不需要的化學(xué)反應(yīng)。為了防止芳香胺類的干擾以pH在10±0.2時較為適宜。為此,就需要在待測溶液中加入氨一氯化錢緩沖溶液調(diào)整和控制待測溶液的pH為10.0±0.2。