細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基為每種特定的細(xì)胞類型進(jìn)行了優(yōu)化,通常比傳統(tǒng)培養(yǎng)基更復(fù)雜。特殊培養(yǎng)基通常被設(shè)計(jì)為低濃度血清或者無(wú)血清,因此培養(yǎng)基需要額外補(bǔ)充生長(zhǎng)因子、脂肪和激素。這種通過(guò)添加特定的組分,可以使培養(yǎng)基的組分和濃度得到優(yōu)化,從而用于培養(yǎng)特定類型的細(xì)胞。
細(xì)胞系和原代細(xì)胞之間存在差異,這些差異影響細(xì)胞對(duì)營(yíng)養(yǎng)的需求。比如:細(xì)胞系增殖能力很強(qiáng),很好地適合于2維培養(yǎng),對(duì)培養(yǎng)條件的要求寬松。與此相反,原代細(xì)胞分離自3維生長(zhǎng)的宿主組織,然后轉(zhuǎn)移到2維環(huán)境中培養(yǎng),所以有著更為復(fù)雜的營(yíng)養(yǎng)需求。此外,原代細(xì)胞比細(xì)胞系的增值能力弱,隨著培養(yǎng)時(shí)間的推移,原代細(xì)胞會(huì)越來(lái)越衰老,而且原代細(xì)胞壽命也短。由于這些差異,特殊培養(yǎng)基往往是原代細(xì)胞培養(yǎng)的一個(gè)更好的選擇。
常見(jiàn)的細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類:
1、RPMI-1640 Medium
RPMI-1640廣泛應(yīng)用于哺乳動(dòng)物、特殊造血細(xì)胞、正常或惡性增生的白細(xì)胞,雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng),是目前應(yīng)用十分廣泛的培養(yǎng)基。主要用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴細(xì)胞、T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞以及HCT-15上皮細(xì)胞等均可參考使用。
2、Minimum Essential Medium(MEM)
也稱必需培養(yǎng)基,它僅含有12種必需氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素。成分簡(jiǎn)單,可廣泛適應(yīng)各種已建成細(xì)胞系和不同地方的哺乳動(dòng)物細(xì)胞類型的培養(yǎng)。MEM-Alpha一般用于培養(yǎng)一些難培養(yǎng)細(xì)胞類型,而其它沒(méi)有特殊之處的細(xì)胞株則幾乎均可采用MEM來(lái)培養(yǎng)。
3、DMEM-高糖(標(biāo)準(zhǔn)型)是一種應(yīng)用十分廣泛的培養(yǎng)基,可用于許多哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),更適合高密度懸浮細(xì)胞培養(yǎng)。適用于附著性較差,但又不希望它脫離原來(lái)生長(zhǎng)點(diǎn)的克隆培養(yǎng),也可用于雜交瘤中骨髓瘤細(xì)胞和DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞的培養(yǎng)。
4、DMEM-低糖(標(biāo)準(zhǔn)型)是一種應(yīng)用十分廣泛的培養(yǎng)基,可用于許多哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。低糖適于依賴性貼壁細(xì)胞培養(yǎng),特別適用于生長(zhǎng)速度快、附著性較差的腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)。