簡要描述：293T（人胚腎細(xì)胞）是293T細(xì)胞株的衍生株，293T是293 [HEK-293]細(xì)胞株插入了SV40 T-antigen的溫度敏感基因形成的高轉(zhuǎn)衍生株。293T細(xì)胞進(jìn)行克隆，檢測pBND和pZAP載體，得到—株能生成高滴度感染逆轉(zhuǎn)錄病毒的衍生株293T細(xì)胞。293T細(xì)胞持續(xù)表達(dá)猿病毒40（SV40）大T抗原，而因其高轉(zhuǎn)染能力篩選到17號(hào)克隆。
產(chǎn)品型號(hào)：廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家更新時(shí)間：2023-06-15訪 問 量：2886| 品牌 | 其他品牌 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
|---|---|---|---|
| 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
| 一、細(xì)胞基本屬性 | |
| 細(xì)胞名稱 | 人胚腎細(xì)胞 |
| 細(xì)胞別稱 | 293T |
| 細(xì)胞貨號(hào) | SNL-015 |
| 細(xì)胞種屬 | 人 |
| 生長情況 | 貼壁 |
| 培養(yǎng)條件 | H-DMEM+10%FBS+1%雙抗 |
| 培養(yǎng)環(huán)境 | air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5% |
| 二、細(xì)胞培養(yǎng)操作 | |
| 換液周期 | 2-3天 |
| 培養(yǎng)基體積 | T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml |
| 傳代比例 | 1:2-1:4（具體情況視細(xì)胞生長速度及密度決定） |
| 傳代方法 | 1.盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基； 2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤洗細(xì)胞10-20s，吸走潤洗的PBS； 3.T25瓶加1ml左右胰M，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶以使胰M鋪勻瓶底細(xì)胞層； 4.將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化； 5.消化到細(xì)胞間隙變大，但未*脫落時(shí)加2-3ml*培養(yǎng)基終止胰M消化； 6.混勻細(xì)胞，900rpm離心3-5min，棄上清； 7.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細(xì)胞，均勻分到新的培養(yǎng)瓶里； 8.補(bǔ)足*培養(yǎng)基，將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)； |
| 注意事項(xiàng) | 不同品牌胰M消化時(shí)間差別較大，注意嚴(yán)格控制消化時(shí)間 消化傳代細(xì)胞時(shí)吹打細(xì)胞注意盡量輕柔，不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細(xì)胞狀態(tài)。 |
| 三、細(xì)胞凍存操作 | |
| 凍存液配方 | 92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手推薦); |
| 凍存規(guī)格 | 200-300萬/ml，1ml每管 |
| 凍存方法 | 1. 離心獲得細(xì)胞沉淀后，加配置好的凍存液輕輕重懸細(xì)胞； 2. 將細(xì)胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標(biāo)記的凍存管； 3. 將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒，放入-80度冰箱過夜，第二天轉(zhuǎn)入液氮保存；沒有程序凍存盒的實(shí)驗(yàn)室，加入細(xì)胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min，再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過夜，第二天轉(zhuǎn)入液氮保存 |
| 注意事項(xiàng) | 凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時(shí)復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性，若有異常，及時(shí)調(diào)整實(shí)驗(yàn)方案 |
Tips：
1.細(xì)胞貼壁較弱，消化時(shí)間偏短，注意控制消化時(shí)間；
2.T25瓶細(xì)胞發(fā)貨易漂浮成團(tuán)，收貨若成團(tuán)按收貨處理規(guī)定進(jìn)行；
3.細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)可能會(huì)有部分黑點(diǎn)，屬正?，F(xiàn)象，具體原因參見培養(yǎng)操作說明2、3條；
我們推薦使用尚恩生物293T（人胚腎細(xì)胞）zhuan用*培養(yǎng)基（產(chǎn)品貨號(hào)：SNLM-015）作為體外培養(yǎng)293T（人胚腎細(xì)胞）的培養(yǎng)基。
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