您的位置： 首頁 > 產(chǎn)品中心 > 細(xì)胞系 > 細(xì)胞 > SNL-027NRK 52E細(xì)胞大鼠腎細(xì)胞NRK 52E國內(nèi)廠家

NRK 52E細(xì)胞大鼠腎細(xì)胞NRK 52E國內(nèi)廠家

簡要描述：NRK 52E細(xì)胞大鼠腎細(xì)胞NRK 52E國內(nèi)廠家
細(xì)胞名稱大鼠腎細(xì)胞
細(xì)胞別稱NRK-52E; NRK 52E; NRK52E; NRK clone 52E; Normal Rat Kidney-52E; NRK-E52
細(xì)胞貨號SNL-027
細(xì)胞種屬大鼠
生長情況貼壁

產(chǎn)品型號：SNL-027
廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家
更新時間：2023-05-31
訪問量：708

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詳細(xì)介紹

品牌	其他品牌	CAS	詳見說明書
分子式	詳見說明書	純度	詳見說明書
分子量	詳見說明書	貨號	SNL-027
規(guī)格	T25瓶	供貨周期	現(xiàn)貨
主要用途	實驗	應(yīng)用領(lǐng)域	化工,生物產(chǎn)業(yè),能源

NRK 52E細(xì)胞大鼠腎細(xì)胞NRK 52E國內(nèi)廠家

------尚恩生物 I8627859203-------

一、細(xì)胞基本屬性

細(xì)胞名稱大鼠腎細(xì)胞

細(xì)胞別稱NRK-52E; NRK 52E; NRK52E; NRK clone 52E; Normal Rat Kidney-52E; NRK-E52

細(xì)胞貨號SNL-027

細(xì)胞種屬大鼠

生長情況貼壁

培養(yǎng)條件H-DMEM+10%FBS+1%雙抗

培養(yǎng)環(huán)境air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%

二、細(xì)胞培養(yǎng)操作

換液周期2-3天

培養(yǎng)基體積T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml

傳代比例1:2-1:4（具體情況視細(xì)胞生長速度及密度決定）

傳代方法1.盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基；

2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤洗細(xì)胞10-20s，吸走潤洗的PBS；

3.T25瓶加1ml左右胰m，輕輕晃動培養(yǎng)瓶以使胰m鋪勻瓶底細(xì)胞層；

4.將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化；

5.消化到細(xì)胞間隙變大，但未*脫落時加2-3ml*培養(yǎng)基終止胰m消化；

6.混勻細(xì)胞，900rpm離心3-5min，棄上清；

7.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細(xì)胞，均勻分到新的培養(yǎng)瓶里；

8.補足*培養(yǎng)基，將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)；

注意事項不同品牌胰m消化時間差別較大，注意嚴(yán)格控制消化時間

消化傳代細(xì)胞時吹打細(xì)胞注意盡量輕柔，不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細(xì)胞狀態(tài)。

三、細(xì)胞凍存操作

凍存液配方92%FBS+8%DMSO(新手建議)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手建議);

凍存規(guī)格200-300萬/ml，1ml每管

凍存方法1. 離心獲得細(xì)胞沉淀后，加配置好的凍存液輕輕重懸細(xì)胞；

2. 將細(xì)胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標(biāo)記的凍存管；

3. 將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒，放入-80度冰箱過夜，第二天轉(zhuǎn)入液氮保存；沒有程序凍存盒的實驗室，加入細(xì)胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min，再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過夜，第二天轉(zhuǎn)入液氮保存

注意事項凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性，若有異常，及時調(diào)整實驗方案

	處理步驟	T25瓶	凍存管
1	快遞保存溫度	室溫	液氮長期保存或-80度3天以內(nèi)
2	初步平衡	T25瓶表面消毒后，放37度培養(yǎng)箱平衡復(fù)溫2h以上	無須平衡，直接放入-80冰箱或者液氮罐保存
3	處理方式	吸走大部分培養(yǎng)基，留10-12ml培養(yǎng)基，拍照并觀察細(xì)胞。密度80%以上即可吸走培養(yǎng)基消化傳代，若密度低于80%可以留10-12 ml繼續(xù)培養(yǎng)至細(xì)胞密度80%以上	37度水浴搖晃盡快融化細(xì)胞，直接在凍存管內(nèi)將細(xì)胞離心。離心轉(zhuǎn)速以離心力150g(約900rpm)左右，1min為宜，棄上清，沉淀用新鮮培養(yǎng)基重懸后接種到10cm培養(yǎng)皿，顯微鏡下觀察細(xì)胞并拍照，24h后換液一次
4	接種方式	T25傳代第①次建議1:2傳代，即瓶T25傳成兩瓶	一管細(xì)胞建議接種到10cm培養(yǎng)皿或者T25瓶
5	注意事項	若細(xì)胞出現(xiàn)漂浮，T25瓶不開封，放至37度培養(yǎng)箱過夜，若細(xì)胞貼壁即說明活性正常，按正常操作消化傳代即可；若未貼壁，收集細(xì)胞培養(yǎng)基離心后，將細(xì)胞重懸接種到新的培養(yǎng)瓶中，同時原瓶還貼壁的細(xì)胞加培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng) 發(fā)貨T25瓶裝滿大約有75ml培養(yǎng)基，可以收集起來，1500rpm離心5min后，取上清4度保存，用于培養(yǎng)細(xì)胞，以平穩(wěn)過渡到客戶自己的培養(yǎng)基	收貨時若發(fā)現(xiàn)干冰化完，檢查凍存管是否融化，若已融化需直接離心細(xì)胞接種觀察，若未融化可以將細(xì)胞按正常步驟保存，以上情況及時反饋干冰發(fā)貨的細(xì)胞只能在-80保存3天左右，長時間保存會出現(xiàn)活性下降。干冰發(fā)貨均為兩支，客戶先復(fù)蘇一支，若復(fù)蘇失敗及時聯(lián)系我方并在我方指導(dǎo)下復(fù)蘇第二支。若客戶同時復(fù)蘇兩支均狀態(tài)不佳，我方將不提供免費售后服務(wù)

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