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小鼠角膜上皮細胞

簡要描述:尚恩生物依托國際化的*技術(shù)及多年專業(yè)化的原代細胞分離培養(yǎng)經(jīng)驗,能夠為您提供高品質(zhì)的原代細胞、原代細胞提取物定制服務。集結(jié)豐富經(jīng)驗的人才,并配備了整套實驗設(shè)備,全程自主研發(fā),嚴控開發(fā)流程,保障產(chǎn)品質(zhì)量,緊抓售后服務,可以提供高質(zhì)量的小鼠角膜上皮細胞。已與國內(nèi)外多家科研單位、藥企、以及醫(yī)院等建立了良好的合作關(guān)系,成為生物醫(yī)藥行業(yè)的誠信伙伴和堅強后盾。

  • 產(chǎn)品型號:SNP-M090
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時間:2023-04-20
  • 訪  問  量:693
詳細介紹
品牌其他品牌貨號SNP-M090
規(guī)格T25瓶供貨周期現(xiàn)貨
主要用途實驗應用領(lǐng)域生物產(chǎn)業(yè)

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一、細胞基本屬性

貨號:SNP-M090

產(chǎn)品名稱:小鼠角膜上皮細胞

物種:小鼠

組織來源:眼角膜組織

細胞簡介:該細胞分離自眼角膜組織;角膜位于眼球前壁的一層透明膜,約占纖維膜的前1/6,從后面看角膜呈正圓形,從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不盡相同,中央部最薄。角膜有十分敏感的神經(jīng)末梢,如有外物接觸角膜,眼瞼便會不由自主地合上以保護眼睛。為了保持透明,角膜并沒有血管,透過外界空氣、淚液及房水獲取養(yǎng)份及氧氣。角膜分為五層,由前向后依次為:上皮細胞層、前彈力層、基質(zhì)層、后彈力層、內(nèi)皮細胞層。其主要功能如下:①角膜是無血管的組織,具有透明的特性和合成許多蛋白的功能,分三層細胞層,外層即是上皮細胞;②角膜上皮細胞能參與先天性免疫,能感應病原體存在并發(fā)出信號從而激活角膜防御系統(tǒng);③角膜上皮細胞能高效表達醛脫氫酶。角膜上皮細胞的體外培養(yǎng)對研究角膜的生理學、病理學、免疫學以及分子生物學都是極為重要的手段,常用于研究細胞代謝產(chǎn)物、病毒感染、各種生長因子和藥物對細胞生長的影響。

方法簡介:采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10^5cells/瓶。

配套體系:上皮體系

發(fā)貨形式:T25瓶(1×106左右)

規(guī)格:5×10^5cells/T25瓶

培養(yǎng)條件:具體培養(yǎng)條件詳詢尚恩生物細胞培養(yǎng)技術(shù)專員

培養(yǎng)環(huán)境:37℃,5%二氧化碳

我們推薦使用尚恩生物小鼠角膜上皮細胞專用*培養(yǎng)基(產(chǎn)品貨號:SNPM-M090)作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。


二、細胞培養(yǎng)操作

換液周期2-3天
培養(yǎng)基體積T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
傳代比例1:2-1:4(具體情況視細胞生長速度及密度決定)
傳代方法1.盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基
2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤洗細胞10-20s,吸走潤洗的PBS;
3.T25瓶加1ml左右,輕輕晃動培養(yǎng)瓶以使鋪勻瓶底細胞層;
4.將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化;
5.消化到細胞間隙變大,但未*脫落時加2-3ml*培養(yǎng)基終止消化;
6.混勻細胞,900rpm離心3-5min,棄上清;
7.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細胞,均勻分到新的培養(yǎng)瓶里;
8.補足*培養(yǎng)基,將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);
注意事項不同品牌消化時間差別較大,注意嚴格控制消化時間

消化傳代細胞時吹打細胞注意盡量輕柔,不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細胞狀態(tài)。


三、細胞凍存操作
凍存液配方92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手推薦);
凍存規(guī)格200-300萬/ml,1ml每管
凍存方法1.消化并離心獲得細胞沉淀后,加配置好的凍存液輕輕重懸細胞;
2.將細胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標記的凍存管;
3.將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒,放入-80度冰箱過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存;沒有程序凍存盒的實驗室,加入細胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存

注意事項凍存細胞轉(zhuǎn)入液氮后及時復蘇一管檢查細胞凍存活性,若有異常,及時調(diào)整實驗方案


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