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大鼠食管上皮細胞

簡要描述:尚恩生物依托國際化的*技術(shù)及多年專業(yè)化的原代細胞分離培養(yǎng)經(jīng)驗,能夠為您提供高品質(zhì)的原代細胞、原代細胞提取物定制服務(wù)。集結(jié)豐富經(jīng)驗的人才,并配備了整套實驗設(shè)備,全程自主研發(fā),嚴控開發(fā)流程,保障產(chǎn)品質(zhì)量,緊抓售后服務(wù),可以提供高質(zhì)量的大鼠食管上皮細胞。已與國內(nèi)外多家科研單位、藥企、以及醫(yī)院等建立了良好的合作關(guān)系,成為生物醫(yī)藥行業(yè)的誠信伙伴和堅強后盾。

  • 產(chǎn)品型號:SNP-R058
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時間:2023-04-20
  • 訪  問  量:476
詳細介紹
品牌其他品牌貨號SNP-R058
規(guī)格T25瓶供貨周期現(xiàn)貨
主要用途實驗應(yīng)用領(lǐng)域生物產(chǎn)業(yè)

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一、細胞基本屬性

貨號:SNP-R058

產(chǎn)品名稱:大鼠食管上皮細胞

物種:大鼠

組織來源:食管組織

細胞簡介:該細胞分離自食管組織;食管是咽和胃之間的消化管,食管在系統(tǒng)發(fā)生上起初很短,隨著頸部的伸長和心肺的下降,而逐漸增長。食管可分為頸段、胸段和腹段。脊椎動物食管的頸段位于氣管背后和脊柱前端,胸段位于左、右肺之間的縱膈內(nèi),胸段通過膈孔與腹腔內(nèi)腹相連,腹段很短與胃相連。在發(fā)育過程中,食管的上皮細胞增殖,由單層變?yōu)閺蛯樱彻苁构芮蛔儶M窄,甚至一度閉鎖,以后管腔又重新出現(xiàn)。哺乳動物的食管結(jié)構(gòu)上由內(nèi)向外分四層:黏膜層、黏膜下層、肌層和外膜。其中,黏膜層,包括上皮、固有層和黏膜肌層。上皮為較厚的未角化的復層扁平上皮,耐摩擦,有保護作用。在食管與胃賁門交界處,復層扁平上皮突然變成單層柱狀上皮。食管被一層線性排列的、無角化、潮濕的復層扁平上皮細胞覆蓋,其頂端細胞膜和細胞間連接復合體聯(lián)合在一起產(chǎn)生有效滲透屏障,防止食管內(nèi)容物的滲入。特別的是,層屏障使表層細胞的基質(zhì)外側(cè)細胞膜和深層細胞的全部細胞膜不暴露于食管腔內(nèi)規(guī)律的大幅波動的滲透壓之下。從組織學上講,食管上皮由兩層組成,基底層和分化層;其中,僅基底層的細胞可以增殖,然后向食管腔移行。移行過程伴隨有分化的發(fā)生和分化標記的依序表達。食管上皮細胞的培養(yǎng)是研究食管正常生理機制和食管癌變機制的非常好的體外模型。

方法簡介:采用鏈霉蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法,并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10^5cells/瓶。

配套體系:上皮體系

發(fā)貨形式:T25瓶(1×106左右)

規(guī)格:5×10^5cells/T25瓶

培養(yǎng)條件:具體培養(yǎng)條件詳詢尚恩生物細胞培養(yǎng)技術(shù)專員

培養(yǎng)環(huán)境:37℃,5%二氧化碳

我們推薦使用尚恩生物大鼠食管上皮細胞專用*培養(yǎng)基(產(chǎn)品貨號:SNP-R058)作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。


二、細胞培養(yǎng)操作

換液周期2-3天
培養(yǎng)基體積T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
傳代比例1:2-1:4(具體情況視細胞生長速度及密度決定)
傳代方法1.盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基
2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤洗細胞10-20s,吸走潤洗的PBS;
3.T25瓶加1ml左右,輕輕晃動培養(yǎng)瓶以使鋪勻瓶底細胞層;
4.將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化;
5.消化到細胞間隙變大,但未*脫落時加2-3ml*培養(yǎng)基終止消化;
6.混勻細胞,900rpm離心3-5min,棄上清;
7.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細胞,均勻分到新的培養(yǎng)瓶里;
8.補足*培養(yǎng)基,將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);
注意事項不同品牌消化時間差別較大,注意嚴格控制消化時間

消化傳代細胞時吹打細胞注意盡量輕柔,不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細胞狀態(tài)。


三、細胞凍存操作
凍存液配方92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手推薦);
凍存規(guī)格200-300萬/ml,1ml每管
凍存方法1.消化并離心獲得細胞沉淀后,加配置好的凍存液輕輕重懸細胞;
2.將細胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標記的凍存管;
3.將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒,放入-80度冰箱過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存;沒有程序凍存盒的實驗室,加入細胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存

注意事項凍存細胞轉(zhuǎn)入液氮后及時復蘇一管檢查細胞凍存活性,若有異常,及時調(diào)整實驗方案


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